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一直以來(lái),高濃度樣品Zeta電位檢測(cè)都是市場(chǎng)需求。在電泳光散射技術(shù)中,由于需要散射光透過(guò)樣品進(jìn)入前向的檢測(cè)器(通常角度在12-15°方向),樣品的濃度不能過(guò)高。常用電極包括插入式電極(光程10mm)和毛細(xì)管構(gòu)造電極(常見(jiàn)光程4mm),雖然毛細(xì)管電極的光程遠(yuǎn)低于插入式電極,具有一定的檢測(cè)高濃度樣品的能力,但是往往不能完全滿足需求,而且毛細(xì)管電極最低樣品量為0.75mL,也不能滿足微量樣品測(cè)試的需求。因此丹東百特開(kāi)發(fā)了光程更短的高濃度電極,不但極大地提高了對(duì)高濃度樣品的檢測(cè)能力,而且所需樣品量?jī)H為~250μ L,電極成本相對(duì)較低,可拋棄。
圖1. 毛細(xì)管電極(左圖)和高濃度Zeta電位電極(右圖)
在這篇應(yīng)用報(bào)告中,我們使用丹東百特儀器公司最新推出的BeNano 180 Zeta Max納米粒度及Zeta電位儀和高濃度電極檢測(cè)了分散在水性環(huán)境中的脂肪乳的Zeta電位。
原理
電泳光散射技術(shù)ELS是利用激光照射樣品溶液或懸浮液,檢測(cè)前向角度的散射光信號(hào)。在樣品兩端施加一個(gè)電場(chǎng),樣品中的帶電顆粒在電場(chǎng)力的驅(qū)動(dòng)下進(jìn)行電泳運(yùn)動(dòng)。由于顆粒的電泳運(yùn)動(dòng),樣品的散射光的頻率會(huì)產(chǎn)生一個(gè)頻移,即多普勒頻移。利用數(shù)學(xué)方法處理散射光信號(hào),得到散射光的頻率移動(dòng),進(jìn)而得到顆粒的電泳運(yùn)動(dòng)速度,即電泳遷移率μ。通過(guò)Herry方程,我們把顆粒的電泳遷移率和其Zeta電位ζ聯(lián)系起來(lái):
其中ε為介電常數(shù),??為溶劑粘度,f(κα)為Henry函數(shù),κ為德拜半徑倒數(shù),α代表粒徑,κα代表了雙電層厚度和顆粒半徑的比值。
我們采用丹東百特公司的BeNano 180 Zeta Max納米粒度及Zeta電位儀進(jìn)行測(cè)試。儀器使用波長(zhǎng)671 nm、功率50 mW的激光器作為光源,設(shè)置在12度角的APD檢測(cè)器進(jìn)行散射光信號(hào)采集。采用PALS相位分析光散射技術(shù),可以有效檢測(cè)低電泳遷移率樣品的Zeta電位信息。
樣品制備和測(cè)試條件
一個(gè)原濃度為20%的脂肪乳樣品,通過(guò)加入蒸餾水稀釋為不同濃度,采用毛細(xì)管電極和高濃度電極對(duì)樣品進(jìn)行比對(duì)檢測(cè)。
測(cè)試在25℃下進(jìn)行,每個(gè)濃度下,使用兩種電極均進(jìn)行三次檢測(cè),得到平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。
測(cè)試結(jié)果和討論
圖2. Zeta電位隨濃度變化曲線
檢測(cè)結(jié)果如圖2所示,不論是毛細(xì)管電極還是高濃度電極,在每個(gè)濃度下的檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性都很好,顯示了較低的標(biāo)準(zhǔn)偏差。兩個(gè)電極的Zeta電位都隨濃度增大而降低。
Zeta電位隨脂肪乳樣品濃度增加而降低是由兩個(gè)因素導(dǎo)致的:一是濃度增大后顆粒的電泳運(yùn)動(dòng)受限,受阻的電泳運(yùn)動(dòng)使檢測(cè)結(jié)果降低;二是強(qiáng)烈的多重光散射也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)值降低。
從結(jié)果可以看出,在濃度小于0.6%的范圍內(nèi),兩個(gè)電極的結(jié)果一致性較好;但是在濃度為0.6%~2%的范圍內(nèi),毛細(xì)管電極的檢測(cè)結(jié)果明顯比高濃度電極低,這是由于多重光散射對(duì)結(jié)果的影響。在濃度6%以上,兩個(gè)電極的結(jié)果都趨近于0,此時(shí)濃度太高,脂肪乳顆粒幾乎無(wú)法有效進(jìn)行電泳運(yùn)動(dòng)。
從結(jié)果可以看出,在一個(gè)寬泛的較高濃度范圍(對(duì)于脂肪乳樣品而言為0.6%~6%)內(nèi),高濃度電極的檢測(cè)結(jié)果相較于毛細(xì)管電極更高,說(shuō)明其受多重光散射的影響更小。使用高濃度電極可以有效提升設(shè)備對(duì)高濃度樣品的檢測(cè)能力和準(zhǔn)確性。
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